级博士研究生赵文宇
——那些年我们一起做实验的日子
动笔之时，恰好是年的1月1日，十分适合怀念过去，展望未来。过去的一年于我来说，是人生大的转折，首当其冲就是博士毕业。说实话，读博那会，经常盼着毕业，就像高三学生盼着上了大学就轻松了一样，还是tooyoung。
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读博经历
我读博的大部分时间，大部分的实验都是在沈阳的老校区完成了，在18年10月份随着实验室一起搬到了新校区，19年6月份答辩毕业，经历了学校、也是课题组一个大的变化，再加上整个过程中实验条件的改善，现在看来，我读博的日子正好赶上了课题组厚积薄发，科研水平明显上升的阶段。正好看到昨天（12月31号）课题组又在年终总结，我就想起来之前几年，老师提出过两个目标，计划（好像不是这个名儿，记不太清了），只记得我们每次都可以超额完成，那真是美好的日子。
说我自己的课题，我博士期间做的植物是苦木，课题最初的来源是刘志翔师兄，当时课题组方向刚刚转向肿瘤细胞毒，应该是王笛筛选了一系列植物提取物，还记得是在老师在老科研楼研究生处的办公室开的选题会。后来，是在的实验室，跟黄老师、李丹琦师姐聊天的时候，最终确定了去做苦木。俗话说，读大学时流的泪就是选专业时候脑子进的水。我大部分的分离工作是在新科研楼室完成的，张艳老师告诉我，的窗户正好跟老师老科研楼的办公室的窗户对着，有那么几次，我在实验室看着老师办公室的窗户想，当时选一个别的植物，人生会不会容易的多？
我从苦木中共分离得到4类化学成分，分别是生物碱类，苦木素类，甘遂烷型三萜类，以及酚酸木脂素。做到17年9月份的时候，分到了多个化合物，新化合物只有10个，记得当时中期考核，华老师就建议我换个题。的确，做为天然药化的学生，新化合物本身就是创新性的一部分，而我很多都是在重复别人的工作。现在回想，那是博士课题最难的时候，我当然也想过放弃，事实上已经准备放弃了，虽说太顺利的博士也不值得读，但我当时真觉得会不会太过坎坷了？
那时是宋老师跟黄老师劝我再坚持一下，我也想着都是老师师兄师姐起早贪黑选的题，不至于这么差吧。当然也是因为懒，感觉从头做太累，又坚持了一下，好在结果还不错。毕业的时候也跟大家交流，发现做分离开头顺利，往后也会越来越难；开头难，后面说不定会比较顺利；当然，最常见的还是从开头一直到结尾都挺难。每个人遇到的困难都不同，相同的是每个人都会遇到困难，还是应该坚持一下，实在不行再换题。
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课题情况
说回到实验，一个课题，我们看到的都是已经发表的文章，这其实也是说明我们看到的都是做成的，没做成的文章也发不出来。现在回头想我做的课题，也是有不少的遗憾，这些甚至可以按分离得到的化合物的结构分类，包括以下：
1.我做分离的初期，尝试了细胞毒活性导向的分离，最终也追踪到了活性部位以及活性比较好的单体成分，与同科植物鸦胆子中著名的抗肿瘤成分鸦胆子苦醇（苦木素类）不同，苦木中细胞毒的成分应该是生物碱类。之后，课题组娄丽丽博士也做了裸鼠荷瘤的动物实验，证明了体外活性较好的化合物在体内也是有作用的。但是在这个过程中就有缺失的一环，就是药物吸收的部分。抗肿瘤活性涉及机制复杂，但是首先必须是化合物经肠道或是其他部位吸收入血，才有可能到达肿瘤部位。应该增加一个实验，哪怕不用造模的老鼠，用普通老鼠苦木提取物灌胃，液质检测生物碱类成分，有对照品，生物碱质谱响应好，多半能检测到，证明可以入血；另一方面，可以质谱检测有没有到达肿瘤组织，再加上有文献报道成熟的裂解规律，甚至可以检测是原型还是代谢物起作用。
2.既然推测抗肿瘤的活性成分是生物碱类，应尝试做一点衍生化。其实这一类的生物碱研究肿瘤细胞毒的报道很多，简单的衍生化可能不容易有新颖性，可以结合我们从植物来源的优势，结合生源合成的推测，尝试通过一些简单的方法，如2+2光化学合成尝试得到生物碱的二聚体，一方面证实生合成的合理性，另一方面也得到了新颖的结构。
3.说到合成，我从苦木中分离得到了一类在侧链连续有3个羟基取代的三萜，这类结构现有的确定绝对构型的方法其实是有问题的，18年刘庆博老师回国之后，在他的帮助下，我们尝试采用苯甲酸衍生化之后，测试CD激子手性的方法确定其构型，再加上苯甲酸衍生化之后化合物容易得到单晶，这样也有了验证结果的手段。但是，当时忽略了化合物本身的CD吸收，再加上激子手性要求有比较稳定的构象形成固定的夹角，有的化合物并不适用。其实可以尝试像铑盐类似的CD差谱的方法，先测本底化合物的CD当做溶剂扣除，然后再测衍生化之后的，同样浓度的CD，得到的就是目标位置的CD谱图，进一步通过计算4个构型的模型化合物的CD，与实测对比，或许可以建立一套确定此类结构绝对构型的方法。一个想法，不一定能成。
4.在分离完成之后，实验技能方面学到最多的就是关于量子化学计算方面的了，现在看来，当时计算的方法也有很多需要改进的地方，包括结构优化没有考虑色散校正，核磁计算的方法也许并不适合等。
不能再写了，太细节了。现在越来越觉得一个课题需要从一个整体的角度去设计操作，那时候彭老师说过，做实验就像是画一张人脸，无论眉毛画的多好看，都不是一张脸，应该还是先不管好看不好看，先画一张脸，再去抠细节。总的来说，当时缺乏从整体的角度对于课题的思考，最遗憾的是也没有利用好课题组提供的平台，彭老师的液质就在对门，就只用来测高分辨，做个简单的代谢，也许一个礼拜就能完事，就能使课题逻辑上更合理；刘庆博老师回国之后，也应该尝试做一些简单的衍生化，利用好结构的多样性；有一段时间，我也跑去找张艳老师、姚国栋老师和药理小分队的同学学习文献，但总的来说，与药理小组的配合也仅限于按照老师们的实验设计等待结果，也没一起去讨论还能做点什么。
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一些想法
毕业之后，总有人问，读博累吗？累是真的累，以后可能也很难有一周七天，每天15个小时待在实验室的经历了。问题是，尽力了吗，还真不好说。实验的可能性那么多，很多也没敢去尝试，只选择了最稳妥的一条路，留下了许多的遗憾。工作之后，才觉得老师真不容易，我们只操心实验都感觉筋疲力尽，优秀的人果然都精力充沛。
也会有人问，读博值吗。值，真的值。回想起来，发表的文章或许不是重要的，重要的是学到的实验技能，科研的思路，以及，那些回忆。
作者简介
赵文宇，年10月出生于山西交城，年7月于山西长治医学院药学专业获得学士学位，年7月于华中科技大学同济药学院中药学专业获得硕士学位，年考入沈阳药科大学攻读天然药物化学博士学位，导师宋少江教授。博士课题为苦木的化学成分及药理活性研究。研究生阶段运用多种色谱分离技术，包括手性色谱，从中药苦木中分离得到个化合物，其中新化合物43个。进一步研究了这些化合物的抗肝癌和神经细胞保护活性。博士阶段在JournalofNaturalProducts、Phytochemistry、BioorganicChemistry、PlantaMedica、Fitoterapia上发表第一作者SCI论文5篇。年6月博士毕业后入职大连医科大学中西医结合学院，从事教学和科研工作。
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